Nanopore store: 快速条形码测序试剂盒-24 V14

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一种简便快捷的基因组 DNA 建库方法，支持多达24个基因组DNA样本的混样建库。

本试剂盒采用我们最新推出的试剂盒14系列试剂。

3Released

Products from Oxford Nanopore Technologies that have completed their Early Access
Users can continue to provide feedback through feature request pinboard
Warranty periods extended to 1 – 3 months
Product continues to iterate with upgrade notifications of up to 3 months
Lead time visible in store
Product subject to availability

Information

我们推荐有以下需求的用户使用该试剂盒：

希望为多达24个样本混样测序以降低单个样本的测序成本
希望在短时间内制备文库
希望通过免扩增的方式混样建库，以保留碱基修饰等信息。
当前实验器材有限

请注意：使用本试剂盒，您需要购买额外的第三方试剂：详情请见“第三方材料”板块。

当单张测序芯片能产出的总数据量高于单个样本所需数据量时，将多个样本混样测序再进行条码拆分，可提高芯片的利用效率，并节省用户对单个样本的测序支出。

快速条形码测序试剂盒-24 V14 的特点：

特征	详情
制备时间	60 分钟
起始材料要求	每个样本200ng基因组DNA
是否需要PCR	不需要
片段化	基于转座酶
读长	随机分布；取决于起始材料的片段长度
试剂盒所用试剂	试剂盒14系列试剂（V14）
相关实验指南	请参阅 Protocols（实验指南）一节
规格大小	6次反应
储存	-20°C 到 -30°C
稳定性	本试剂盒在运输过程中可在不高于 25ºC 的条件下稳定保存 7 天。收到后，请置于 -20°C 至 -30°C 条件下保存。 Oxford Nanopore Technologies 规定产品质保期为交付之日起三个月内。

快速条形码测序试剂盒-24 V14（SQK-RBK114.24）为一款可独立使用的试剂盒，以操作简便速度快捷著称，且无需借助PCR扩增即可为多达24个样本建库并混样测序。本试剂盒的核心成分为转座酶。它能够在切割模板分子的同时，将带有条形码的标签连接至酶切端。本试剂盒内含24种不同条形码。

该试剂盒采用最新的试剂盒 14系列试剂，当与我们最新推出的纳米孔R10.4.1联用时，原始序列准确率众数进一步提高且产出量增大。我们已重新调配测序芯片预处理试剂和测序试剂，以兼容经过改良的试剂盒14系列测序接头及R10.4.1纳米孔。

试剂盒14系列亦沿用了之前产品的优势，例如：接头的核酸链捕获率更高，因此测序芯片的文库上样量更低；接头采用能量稳固技术，免去用户在操作用时较长的测序实验时，中途向芯片添加额外能量。

请注意：本试剂盒虽能产出质量值在Q20以上的高准确率测序数据，且可产出互补双链数据，但试剂盒以简便快捷为首要优化目标。如您对准确度有较高要求，我们推荐您使用我们的免扩增条形码测序试剂盒-24 V14（SQK-NBD114.24）。

尽管本试剂盒中的转座酶能片段化样本，但因本实验流程简单且仅涉及少量的样本操作（无纯化步骤且仅保留必要的移液步骤），因此当样本中含有长片段时，会输出一定量的长读长测序结果。如希望测序产出长读长，则起始材料中必须含有长片段。

本工作流程不涉及PCR扩增步骤，因此不存在扩增偏倚并保留了序列中的碱基修饰信息。您可使用纳米孔社区开发的工具对其进行分析。

运输和物流：

测序芯片和试剂盒均置于环保且控温的装运箱中一起运输。

大陆地区工作日均可发货，根据运输情况1-3天到达。港澳台地区每周一从英国发货。

Workflow

快速条形码测序试剂盒-24 V14 可为纯化的基因组DNA添加条码，完成混样建库。试剂盒的核心成分为转座酶，它能在切割模板分子的同时，将含条形码的标签连接至酶切端。混合各含条码样本后，使用SPRI磁珠纯化，再将快速测序文库接头与含条形码的标签端连接。

中文 RBK114 gDNA Workflow

Protocols

• DNA 快速测序 V14- 条形码试剂盒（SQK-RBK114.24 或 SQK-RBK114.96）
• 使用 SQK-RBK114（.24 或.96）进行质粒 DNA 快速建库测序
• 使用 SQK-RBK114（.24 或.96）进行扩增子快速建库测序 • 基于细胞培养样本的 Nanopore 微生物分离株测序解决方案（NO-MISS）（SQK-RBK114 .24 或 .96）

Safety and legal

安全数据表 SQK-RBK114.24

What's in the box

快速条形码测序试剂盒-24 V14 （SQK-RBK114.24）内含试剂可供六次反应使用。

SQK-RBK114.24 plate format

名称	缩写	管盖颜色	管数	溶液体积 (μl)
快速测序文库接头	RA	绿色	1	15
接头缓冲液	ADB	透明	1	100
AMPure XP 磁珠	AXP	琥珀色	2	1200
洗脱缓冲液	EB	黑色	1	500
测序缓冲液	SB	红色	1	700
文库颗粒	LIB	粉色	1	600
文库溶液	LIS	白色管盖，粉色标签	1	600
测序芯片冲洗液	FCF	透明管盖，浅蓝色标签	1	8000
测序芯片系绳	FCT	紫色	1	200
快速连接条形码孔板	RB01-24	-	两板，每板三套条形码组合	每孔5µl

声明：本产品包含由贝克曼库尔特公司（Beckman Coulter, Inc）生产的 AMPure XP 试剂，并可与试剂盒一起于-20°C 下储存（试剂稳定性将不受损害）。

3rd party materials

耗材

1.5 ml Eppendorf DNA LoBind 离心管
2 ml Eppendorf DNA LoBind 离心管
0.2 ml薄壁PCR管
Eppendorf低吸附twin.tec®96孔PCR板，半裙边（Merck，EP0030129504）带热封
无核酸酶水（如ThermoFisher，目录号AM9937）
新制备的80％乙醇（用无核酸酶水配制）
(非必需）牛血清白蛋白 (BSA) (50 mg/mL) （例如Invitrogen™ UltraPure™ BSA (50 mg/mL) 目录号 AM2616），配合 MinION 测序芯片使用

器材

盛有冰的冰桶
微孔板离心机，如Fisherbrand™ 微孔板迷你离心机（Fisher Scientific, 目录号11766427）
计时器
温度设定为30℃及80℃的热循环仪或恒温加热仪
磁力架
Hula混匀仪（低速旋转式混匀仪）
P1000移液枪和枪头
P200移液枪和枪头
P100移液枪和枪头
P20移液枪和枪头
P2移液枪和枪头
多通道移液枪

可选器材

Qubit荧光计（或用于质控检测的等效仪器）

Compatibility

快速条形码测序试剂盒-24 V14 （SQK-RBK114.24）可与以下产品联用：

试剂盒

测序辅助扩展包 V14 (EXP-AUX003)
测序辅助扩展包 XL (EXP-AUX003-XL)
测序芯片清洗试剂盒 (EXP-WSH004)
测序芯片清洗试剂盒 XL (EXP-WSH004-XL)
测序芯片预处理试剂盒 V14 (EXP-FLP004)
测序芯片预处理试剂盒-XL (EXP-FLP004-XL)
快速测序文库接头辅助扩展包 V14 (EXP-RAA114)
Lambda 标准品扩展包 (EXP-CTL001)

测序芯片

FLO-MIN114
FLO-PRO114M
FLO-FLG114

测序设备

Flongle
MinION Mk1B
MinION Mk1C
MinION Mk1D
GridION
PromethION